DRAQ7 Numune Verileri

DRAQ7 birçok uygulamaya sahiptir ve geniş bir alet platformu yelpazesinde mevcut protokollerle son derece uyumludur.

  • dsDNA/ölü veya geçirgen hücrelerin çekirdeklerinin hızlı boyanması
  • Ölü/canlı ayrımı için canlı hücre boyaları ile kombinasyon
  • Kullanımı kolaydır - yıkama gerektirmez, RNase gerektirmez
  • GFP ve FITC etiketleriyle kullanım için idealdir - uzak kırmızı bölgede DRAQ7 floresanları
  • DRAQ7; IF/IHC, yüksek içerikli tarama ve hücre bazlı testler için ideal bir uzak kırmızı DNA karşıt boyasıdır

Spektral Özellikler:

  • 665 nm'den düşük kızılötesine floresan emisyonu
  • Önerilen optimum emisyon filtreleri 695LP, 715LP veya 780 LP içerir
  • Tezgah üstü akış ve lazer tarama sitometrileri ve epifloresan ve UV olmayan konfokal mikroskoplarla optik olarak uyumludur
  • 488 nm, 568 nm ve 633 nm hatlarından suboptimal dalga boylarında faydalı eksitasyon ve ayrıca optimum 647 nm eksitasyon. Propidyum iyodürün aksine UV eksitasyonu yoktur.
  • Akış sitometrisinde yaygın FITC/GFP + PE kombinasyonlarıyla kompenzasyon gerekmez. Birçok canlı hücre boyası ile birleştirilebilir.
  • UV ve vis. aralığı florokromlarla birleştirildiğinde çok hatlı görüntüleme/sitometri sağlar
  • DNA'ya bağlandıktan sonra görünür floresan iyileştirmesi yoktur
  • Foto-ağartma normal olarak gözlemlenmemiştir

Spektral Profil:

Aşağıdaki grafikler, farklı eksitasyon dalga boyları aralığı için sulu çözeltide DRAQ7 için standart emilim ve floresan emisyon spektrumlarını göstermektedir. Görüldüğü üzere DRAQ7, 488 nm sistemleriyle etkili bir şekilde uyarılabilir. Bu durumlarda, yayılan fotonları mümkün olduğunca çok sayıda yakalamak için uzun bant geçiş filtresinin kullanılmasını öneririz.

Eksitasyon:

  • 633 ve 647 nm optimum hat (Exλmax 599/644 nm)
  • 488, 514 ve 568 hatları, suboptimal (sadece akış sitometrisi ile)

Emisyon:

  • >665 nm ila kızılötesi >800 nm (Emλmax 678 nm/694 nm, dsDNA ile arakatkılı)
  • GFP ve FITC gibi görünür aralıkla minimum çakışma
  • Emisyon filtreleri 695LP, 715LP, 725 BP 20 veya 780 LP içerebilir

DRAQ7 sadece membranı bozulmuş hücrelere girer ve etiketler.

Aşağıdaki akış sitometrisi verileri, negatif kontrollere kıyasla 24 saat boyunca 0,1 - 2,0 μM staurosporine maruz kalan insan Jurkat hücrelerinin apoptozunu (DRAQ7'nin girişine izin veren bozulmuş membranlar) göstermektedir.

DRAQ7; Ek V, mitokondriyal membran probları ve hücre sağlığının diğer habercileri gibi reaktiflerle birlikte membrana dayanıklı hücreleri işaretlemek için akış sitometrisi analizinde kullanılabilir. Canlı, bozulmamış hücre geçirgen olmayan DNA boyaları, apoptozun ilerlemesi hakkında bilgi vermek için genellikle Ek V (membranın ters çevrilmediğini bildirir) ile birleştirilir. Aşağıdaki şekilde gösterildiği gibi, DRAQ7 (üst ve orta seri), VP-16 dozlarının artırılmasından kaynaklanan membran sızıntılarının başlangıcını bildirmek için propidyum iyodüre (PI, alt seri) eşdeğer bir şekilde performans gösterir. Ayrıca, DRAQ7, uzak-kırmızı, güçlendirici olmayan DNA bağlayıcı boya gibi yeni olanaklar sunar. Hem günlük hem de lineer ekranlar kullanılarak daha fazla ayrık alt popülasyon tanımlanabilir. Ayrıca, PI'nın aksine, DRAQ7, mavi lazer eksitasyonlu 4 adet olmak üzere birkaç floresan parametresinin paralel olarak ölçülmesine izin verecektir.

DRAQ7, apoptoz testlerinde, sitotoksisite testlerinde, sitolitik antikor testlerinde, hücre sağlığı testlerinde kullanılabilir.

DRAQ7, uzak-kırmızı emisyon sinyali nedeniyle tekli 488 nm eksitasyon kaynağı (argon-iyon lazer) kullanılarak 4 adede kadar diğer floroforlarla kolayca birleştirilebilir.